內(nèi)毒素(endotoxin),也被稱為脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),是一類存在于細(xì)菌細(xì)胞外膜中的分子。它是一種復(fù)雜的生物分子,通常由三個(gè)主要組分構(gòu)成:脂肪酸結(jié)構(gòu)(脂質(zhì)部分)、多糖鏈(多糖部分)和核心多糖。內(nèi)毒素主要存在于革蘭陰性細(xì)菌中,如大腸桿菌(Escherichia coli)、沙門氏菌(Salmonella)、克雷伯菌(Klebsiella)等。
內(nèi)毒素(endotoxin)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)可能會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響,因?yàn)樗且环N免疫激活劑,可能觸發(fā)細(xì)胞的炎癥反應(yīng),影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、健康和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以下是內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的主要影響:
1. 免疫和炎癥反應(yīng): 內(nèi)毒素可以激活細(xì)胞的免疫反應(yīng),導(dǎo)致炎癥因子的釋放,如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)等。這些炎癥因子可以影響細(xì)胞的生理功能,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的紊亂,甚至可能引發(fā)細(xì)胞凋亡。
2. 細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝的影響: 高水平的內(nèi)毒素暴露可能影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝。細(xì)胞在免疫激活狀態(tài)下可能會(huì)減緩生長(zhǎng),因?yàn)樗鼈冃枰獙①Y源用于炎癥反應(yīng)。此外,內(nèi)毒素可能干擾細(xì)胞的代謝途徑,影響蛋白質(zhì)合成、DNA合成等。
3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定性: 在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,內(nèi)毒素的存在可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定性。由于內(nèi)毒素可以影響細(xì)胞的生理狀態(tài),實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能會(huì)受到內(nèi)毒素引起的變化影響,從而降低實(shí)驗(yàn)的可靠性和可重復(fù)性。
4. 影響細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)的表達(dá): 內(nèi)毒素的存在可能導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)的表達(dá)增加。這可能對(duì)特定的研究課題產(chǎn)生影響,如細(xì)胞信號(hào)通路、蛋白質(zhì)相互作用等的研究。
因此,了維護(hù)細(xì)胞的健康狀態(tài)、提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,以及保障產(chǎn)品質(zhì)量和安全性,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)需要減少內(nèi)毒素對(duì)其影響。
選擇內(nèi)毒素含量低的血清是方法之一。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,≤3EU/ml。