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細胞培養(yǎng)技術(shù)，對于實驗環(huán)境的潔凈度有嚴(yán)格的要求。不僅要對細胞實驗用的基礎(chǔ)設(shè)施進行維護，還要定期對環(huán)境進行清潔，防止細胞被真菌、細菌、支原體等微生物污染。
我們反復(fù)強調(diào)要避免細胞的支原體污染。那么，支原體對于細胞培養(yǎng)而言，究竟有何種危害？本期內(nèi)容，為大家介紹支原體污染的危害。
支原體發(fā)現(xiàn)于1898年。自1956年Robinson從細胞培養(yǎng)物中分離出支原體后, 國內(nèi)外關(guān)于支原體污染細胞的報道便層出不窮。支原體廣泛存在于自然界中, 有80余種。
支原體 (Mycoplamsa) 又稱霉形體，歸屬于柔膜體綱 (Mollicutes) ，共有6個屬，120個種別。支原體沒有細胞壁，不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性。
對支原體進行革蘭染色為陰性。不僅如此，支原體對青霉素這類干擾細胞壁合成的抗生素，具有天然抗性。
支原體通常附著在細胞的表面, 并影響其宿主細胞的生理、遺傳等多方面的正常功能, 用這些污染后貌似正常的細胞做試驗或生產(chǎn), 將會嚴(yán)重影響結(jié)果。
1、影響細胞的生長繁殖及形態(tài)
細胞培養(yǎng)物遭受到支原體污染后，會出現(xiàn)生長減慢，細胞病變等情況。
具體表現(xiàn)為以下幾點：
不僅如此，某些支原體還可在侵入細胞８小時內(nèi)，使線粒體膨脹，繼而被破壞，細胞核呈空泡化，細胞微管解聚，培養(yǎng)瓶中細胞與細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積，細胞無法傳代，甚至整個細胞群體溶解。
2、代謝和功能
支原體污染細胞的情況，在形態(tài)上變化不明顯。但需要注意的是，細胞培養(yǎng)基的pH值，會有比較大的變化。更換培養(yǎng)液后幾小時就變酸，培養(yǎng)基中的必需氨基酸被消耗掉，進而改變細胞代謝。
支原體對細胞代謝和功能的影響，具體體現(xiàn)在以下幾個方面：
有研究表明，在單克隆抗體制備中，骨髓瘤或雜交瘤細胞因支原體的污染而導(dǎo)致融合失敗或抗體分泌能力下降以至喪失。
3
引起染色體異常
改變?nèi)旧w組型，通?？蓪?dǎo)致細胞染色體斷裂、數(shù)目減少，出現(xiàn)雙著絲點染色體、環(huán)狀染色體等。
4、影響免疫細胞產(chǎn)量
對于巨噬細胞的培養(yǎng)體系，支原體會抑制干擾素的合成和降低其活性，加大了繼發(fā)感染其他細菌和病毒的幾率。也有研究表明，支原體可以通過植物血凝素，干擾淋巴細胞的刺激和分化。
為了盡可能降低細胞污染支原體的風(fēng)險，應(yīng)定期對實驗環(huán)境進行清潔。
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