前面幾期內容給大家總結了如何判斷在培養(yǎng)過程中,細胞有沒有被支原體污染,還沒看的小伙伴點擊下方傳送鏈接即可到達。
DIY判斷細胞的支原體污染
支原體實驗室檢測方法大PK
今天就來嘮嘮,怎樣處理細胞的支原體污染。
由于每個人的實驗以及樣品情況不一樣,所以處理方法也需要分情況討論,給大家簡單列舉幾個場景,便于理解。
Vol.1
情景一:實驗剛開始且細胞不那么貴重
實驗剛剛開始,所用到的細胞也不貴重。培養(yǎng)了幾代發(fā)現(xiàn)細胞狀態(tài)不對勁,一檢測發(fā)現(xiàn),不幸感染了支原體。
對于這種情況,我們的建議是,直接把細胞連同用過的試劑一起丟掉,并對空間和器械進行支原體祛除的處理(后文會將具體方法)。
畢竟細胞用的支原體祛除試劑也不便宜,而且需要的時間也不算短,搞科研是個費錢費時間的活,要會精打細算。
處理方法:扔掉樣本并清潔空間和器械
處理難度:
Vol.2
情景二:細胞經(jīng)過特殊處理不愿放棄
用到的細胞雖然不算特別珍貴,但實驗已經(jīng)開始一段時間了,傾注了時間和心血的。細胞經(jīng)歷了轉染或者體外刺激,好不容易擴增起來,好幾盤細胞,難道要一夜回到解放前嗎?當!然!不!可!以!
是時候展示真正的技術了!推薦大家使用MB公司的專li符合抗生素Zell Shield®
按照以下使用說明對細胞進行處理:
1、在每次使用Zell Shield®之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法"處理好細胞,再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細胞,能達到最佳的祛除支原體的效果。
2、Zell Shield®常規(guī)為-18℃保存,使用前先融化分裝,后續(xù)依舊-18℃避光保存,使用時按需融化配置。避免反復凍融。
3、Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基(例如:500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養(yǎng)基使用)。
處理方法:Zell Shield®處理細胞
并清潔空間和器械
處理難度:
Vol.3
情景三:細胞本身就非常珍貴不能丟
有時候會遇到一些特別珍貴的細胞或是病毒樣品,即便是污染了也希望可以拯救一下,減少損失。
針對細胞不同的特性,處理方式也有些許區(qū)別:
一、短時間內就要收樣的病毒或細胞樣品:
可以用德國MB公司的Mynox® 對樣本進行快速清除。
它來自枯草芽孢桿菌提取物,可以特異性地與支原體膜結合,改變其通透性,能夠在2-3小時內快速清除支原體,使用方法如下:
二、需要長期培養(yǎng)、保存的樣本:
可以用Mynox® Gold對樣本進行*清除。
它是上面Mynox®的升級版,配合自帶的「鞏固防護液」,可以在后續(xù)的培養(yǎng)中(約1個月)持續(xù)發(fā)揮殺滅支原體的作用,并預防支原體生長,適合需要反復傳代、長期保存的珍貴細胞,方法如下:
以上兩種方法搭配支原體環(huán)境祛除產(chǎn)品一起使用,消滅支原體更*,防止復發(fā)!
處理方法:Mynox®或Mynox® Gold
并清潔空間和器械
處理難度:
Vol.4
情景四:環(huán)境中的支原體祛除
講真,實驗用的支原體祛除試劑屬實不便宜,為了不給支原體卷土重來的機會,最好同時把實驗環(huán)境中的支原體也一起消滅(試驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器),常見的有以下這些方法:
順便用Water Shield™把培養(yǎng)箱和水浴鍋的水槽也一并清潔了,保持水源的潔凈。
處理方法:使用專門的環(huán)境用支原體祛除試劑
處理難度:
雖說現(xiàn)在市面上各種各樣的支原體清除產(chǎn)品層出不窮,但避免污染的最好方式還是注意實驗規(guī)范以及定期清潔,最后希望大家的實驗都順順利利,原理污染。
MB產(chǎn)品最新到貨,包括支原體檢測、祛除相關試劑,可以戳戳鏈接了解詳情:2021海外到貨第七波