支原體污染對(duì)細(xì)胞有很多危害。然而在支原體污染早期,細(xì)胞大多癥狀并不明顯,實(shí)驗(yàn)人不易發(fā)現(xiàn)。污染到中后期,細(xì)胞才會(huì)有如下表現(xiàn):
由于支原體污染早期不易被發(fā)現(xiàn),建議實(shí)驗(yàn)室定期對(duì)細(xì)胞上清做適當(dāng)監(jiān)控(可使用德國(guó)MB公司的Verno ®Gem OneStep試劑盒或Verno ®Gem qOneStep試劑盒,取2ul細(xì)胞上清即可判別是否有支原體污染,靈敏度很高,覆蓋的支原體物種很廣)。
那么,如何區(qū)分支原體污染與細(xì)菌、真菌、病毒的污染呢?
它們的各自表現(xiàn)如下:
細(xì)菌污染
細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯,細(xì)胞大多在24小時(shí)死亡。
霉菌污染
培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長(zhǎng),但時(shí)間長(zhǎng)之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差。
病毒污染
病毒污染不易發(fā)現(xiàn)。細(xì)胞和培養(yǎng)液無(wú)明顯變化。病毒在倒置顯微鏡下也不可見。大多病毒對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)影響不大,有的外源病毒會(huì)造成細(xì)胞變異、轉(zhuǎn)化。病毒的污染會(huì)干擾目的病毒的感染和產(chǎn)量。
支原體污染
支原體在倒置顯微鏡下不可見。早期污染,培養(yǎng)液也不渾濁。后期污染會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)基變色、細(xì)胞生長(zhǎng)受抑、細(xì)胞成團(tuán)、鏡下有小顆粒甚至死亡。
不知以上介紹您是否清楚了,能做好這些污染的防護(hù),相信你培養(yǎng)的細(xì)胞一定越來(lái)越好!